Перевод:
- отчет о проведенном семинаре посвященного лечению гепатита В (это скорее как общая информация о текущем положении дел, разработках, перспективах).
- исследование Китайцев в области HDV (белок TAT связанный с HDAg-L препятствует сборке и секреции вируса гепатита D.)
Радует, что исследования и разработки новых терапевтических подходов продолжаются и по мнению авторов набирают обороты.
Antiviral Res.
2017 14 декабря. Pii: S0166-3542 (17) 30747-7. doi: 10.1016 / j.antiviral.2017.12.006.
Исследовательские приоритеты для открытия лечения хронического гепатита B: Отчет о семинаре.
Block TM 1 , Alter H 2 , Brown N 3 , Brownstein A 4 , Brosgart C 5 , Chang KM 6 , Chen PJ 7 , Cohen C 3 , El-Serag H 8 , Feld J 9 , Gish R 10 , Glenn J 11 , Greten TF 12 , Guo JT 4 , Hoshida Y 13 , Kowdley KV 14 , Li W 15 ,Lok AS 16 , McMahon B 17 , Mehta A 18 , Perrillo R 19 , Rice CM 20 , Rinaudo J 12 , Schinazi RF 21 , Shetty K 22 .
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29248746
сссDNA
Репрессия вируса путем элиминации или подавление транскрипции cccDNA считается одним из главных приоритетов. cccDNA - ядерная форма вирусного генома, которая сохраняется как мини-хромосома (Seeger & Mason, 2004). Она необходима для жизненного цикла вируса и является источником всех вирусных генных продуктов, за исключением субгеномных транскриптов, которые могут быть получены из вирусной ДНК, интегрированной в геном хозяина (Seeger & Mason, 2004). HBV cccDNA представляется очень стабильной, сохраняющейся как минихромосома, отдельно от хромосомы хозяина, она продолжает экспрессировать вирусные генные продукты даже спустя годы после высокоэффективного ингибирования вирусной полимеразы, ингибиторами полимеразы (Werle-Postle, et al., 2014). Стойкость сccDNA является причиной того, что терапию ингибиторами полимеразы не рекомендуется прекращать, ввиду возможного рецидива вируса, а так же реактивации вируса у лиц, получающих иммунодепрессанты (McMahon, et al., 2015; Lok, et al. 2015). Таким образом, лучшее понимание биологии и механизмов регуляции метаболизма cccDNA считается высокоприоритетным. Несколько подходов, в том числе индуцированная лекарством эпигенетическая модификация мини-хромосомы cccDNA, приводящая к транскрипционному замораживанию или дестабилизирующей cccDNA с (CRISPR CAS9) дизайнерскими эндонуклеазами, представляют собой две возможности, которые могут быть предусмотрены (Guo and Guo, 2015; Kennedy et al., 2015) ). Взятые вместе, по сравнению со всеми другими вирусологическими мишенями, наибольший энтузиазм проявляется в том, чтобы преследовать cccDNA как основную цель терапии.
HBx
Функция вирусного белка - HBx начала обсуждаться с момента признания того, что вирусный геном транслирует его. Так же растет понимание того, что он необходим для репликации вируса in vivo (Seeger & Mason, 2015). Имеются также убедительные доказательства того, что HBx играет роль, возможно, основную, в обеспечении транскрипции cccDNA. Таким образом, HBx может представлять мишень, которая, если она будет ингибирована, подавляет транскрипцию cccDNA HBV. Понимание HBx и превращение его в цель для новых терапевтических средств вызвало повышенный интерес и большой энтузиазм.
HBs (HBsAg)
HBsAg является важным вирусным белком, необходимым для секреции и инфекционности вириона (Seeger & Mason, 2015; Block, et al., 2011). Кроме того, HBsAg присутствует в высоких концентрациях в крови и участвует в иммунной модуляции, что и поддерживает хроничность инфекции (Op den Brouw, et al., 2009). Тем не менее, несмотря на то, что данные о роли HBsAg в поддержании иммунологической толерантности к HBV у пациентов с хроническими заболеваниями не подтверждены, снижение циркулирующего HBsAg связано с более благоприятными результатами, а отсутствие снижения HBsAg является надежным отрицательным предиктором реакции на терапию интерфероном (Moucari et al, 2009; Gish et al, 2010, Lee, et al., 2011). Аналогичным образом, снижение HBsAg у пациентов, получавших NUC (Wursthone, et al., 2010), также связано с благоприятными результатами, такими как завершение дорогостоящей терапии и клиренс HBsAg. Несмотря на то, что снижение HBsAg может быть следствием этих клинических исходов, а не их причинами, некоторые из участников выразили значительный интерес по поводу роли HBsAg как иммуно-ингибирующего агента, связанного с патогенезом HBV, что оправдывает нацеленность на терапевтическое вмешательство.
Более того, HBsAg требуется для завершения жизненного цикла HDV , эффективное ингибирование HBsAg также должно ингибировать и HDV. Поэтому был и есть большой энтузиазм по изучению и нацеливанию на HBsAg.
HBc (HBcAg)
HBcAg является важным вирусным белком. Сообщалось, что помимо опосредованного образования капсидов он участвует в вирусной и, возможно, регуляции гена иммуномодуляции, хотя доказательства этого ограничены. По этим причинам HBcAg считается привлекательной противовирусной мишенью, и в настоящее время в разработке уже есть несколько препаратов нацеленных на HBcAg (Liang, Block, et al 2015). По этим причинам он получил хороший, но второстепенный, энтузиазм у рецензентов.
HBe (HBeAg)
HBe представляет собой протеолитический продукт переработки полипептида HBc и секретируется из инфицированных гепатоцитов (Miller, 1987; Seeger & Mason, 2015). Его функция неясна, но была связана с более высокой виремией у людей, регуляцией иммунного распознавания вируса у хозяина (Millich, Liang, et al., McMahon, et al., 2014) и даже установлением хронической инфекции в исследованиях на мышах (Tian, et al., 2016). Поэтому приоритет в дальнейших исследованиях остается довольно высоким, но из-за отсутствия в настоящее время функционального анализа для HBe и неопределенности в отношении его роли в вирусологии и патогенезе, его приоритетность в качестве противовирусной мишени стоит ниже остальных потенциальных мишеней для терапии.
РНКаза Н
РНКаза Н является важным продуктом вирусного гена, и ингибирование его функции в принципе должно иметь антивирусные свойства, как и ингибирование полимеразы (Tavis, et al. 2015). ВИЧ и все ретровирусы зависят от ферментов РНКазы, но маломолекулярные ингибиторы, которые являются селективными и безопасными, были не эффективными. RNAaseH как мишень для HBV считается важной линией для исследований.
Интегрированная ДНК HBV
Геномная ДНК HBV может быть интегрирована в хромосомы инфицированных клеток и регулярно обнаруживается в хромосомах гепатоцеллюлярного рака (Brechot, et al., 1981; Shafritz, et al., 1982; Block, et al., 2003). Однако интеграция не является важным этапом жизненного цикла вируса, поскольку cccDNA является необходимой и достаточной матрицей для вирусных транскриптов (Seeger & Mason 2015). Однако есть свидетельства того, что интегрированная ДНК играет определенную роль в онкогенезе в некоторых (возможно, меньших) случаях ГЦК (Lin 2016, et al., Yang и др., 2016). Более того, появились недавние сообщения о том, что интегрированная ДНК HBV (которая обычно не способна транскрибировать полную вирусную геномную РНК), приводит к экспрессии значительного количества HBsAg (Wooddell, et al., 2016, 2017) и, таким образом, может способствовать патогенезу (Gish, et al. 2015). Поэтому возникает новый интерес к изучению роли интегрированной ДНК HBV в патогенезе хронического гепатита и возможности терапевтического воздействия на нее.
Другие цели, указанные вирусом для противовирусного вмешательства
Возможно, что существуют вирусные генные продукты, которые еще не идентифицированы, но могут служить противовирусными мишенями. Эта возможность должна быть изучена для полного и удовлетворительного понимания биологии HBV, а также для терапевтических целей. Также в эту «другую» категорию включена концепция идентификации лекарств, которые вызывают селективную элиминацию инфицированных клеток. К этим концепциям был большой интерес.
Иммунологические и неиммунологические факторы хозяина
Вирус зависит от хозяина, чтобы завершить жизненный цикл, а так же от функций хозяина, которые включают в себя: конститутивные клеточные процессы, а также врожденную и адаптивную иммунологическую защиту. Врожденные и адаптивные иммунные ответы имеют решающее значение, с одной стороны, для разрешения инфекции, а с другой - в развитии вирусного патогенеза.
Например, большинство взрослых инфицированных демонстрируют устойчивый иммунологический ответ, который приводит к разрешению инфекции (Bertoletti, et al. 2015). Однако хронический гепатит В характеризуется необоснованным и неадекватным иммунологическим ответом на HBV (Chisari, et al 1995).
Лучшее понимание взаимоотношений между вирусом и хозяином является важным для исследований и поисков эффективного лечения. Действительно, считается, что восстановление иммунологического ответа на HBV важно для достижения функционального излечения, не говоря уже о полном клиническом излечении. Таким образом, анализ факторов хозяина и иммунных реакций считается чрезвычайно высоким приоритетом как для клинических, так и для фундаментальных наук.
Гепатит D
HDV требует HBV-коинфекции тех же гепатоцитов, чтобы завершить свой жизненный цикл (Hughes, et al., 2011; Alfaiate et al., 2015). Следовательно, исключение HBV приведет к устранению и HDV, было обсуждение того, следует ли отделять приоритеты HDV и HBV. Около 15-25 миллионов человек во всем мире инфицированы HDV, а суперинфекция обычно ассоциируется с гораздо более агрессивным заболеванием, чем только один гепатит B (Noureddin, et al., 2014). HDV явно представляет собой уникальные вирусологические и клинические проблемы, которые могут быть упущены, если их не принимать во внимание в отдельности . Поэтому было окончательно принято решение рассматривать некоторые предметные области HDV отдельно от HBV;
Изучение гепатита В, D и гепатоцеллюлярной карциномы было ассоциировано с отсутствием инструментов для исследований, начиная от экспериментальных моделей (in vitro и in vivo) до уже стандартизированных. Некоторые ресурсы, такие как стандартизированные могут быть легко предоставлены и иметь большое влияние, при относительно небольших инвестициях. Другие, такие как новые экспериментальные системы, потребуют больших инвестиций, усилий и средств, но при этом будет предоставлено все необходимое для ускорения многих проектов, предложенных в этом документе.
Также важно отметить, что было рассмотрено на конференции в сентябре 2016 года, Американской ассоциацией по изучению болезней печени (ASSLD) и Европейской ассоциацией по изучению печени (EASL): в качестве новых лекарств для хронического гепатита В вводят клинические оценки, что скорее всего, потребует новых реагентов и анализов. То есть текущие конечные точки для оценки эффективности лечения в значительной степени зависят от определения вирусной нагрузки (уровни вирусной ДНК в крови), печеночных ферментов, обнаруженных в крови (например, ALT, AST), и антител к HBsAg. Эти тесты могут оказаться устаревшими для новых подходов. Поэтому необходимо предпринять усилия для производства новых биомаркеров или для развертывания имеющихся в настоящее время тестов, чтобы иметь возможность определять:
(а) пациентов которые получат наибольшую пользу от данной терапии;
(б) когда начинать и прекращать терапию;
(c) степень, в которой новая терапия достигает своей предполагаемой биохимической и клинической цели;
(d) превосходство и / или взаимодополняемость новой терапии по сравнению/ с
другими препаратами против HBV.
Вывод:
Прошло более 50 лет с момента открытия вируса гепатита B и его связи с заболеванием печени и ГЦК (Block, Alter et al., 2016). В настоящее время растет потребность в разработке эффективных методов лечения, и есть также оптимизм в отношении того, что настало время для значительного прогресса, учитывая сочетание новых ресурсов и новой информации о вирусе. Например, в настоящее время существуют устойчивые системы тканевой культуры для инфицирования и роста HBV, что позволяет изучать многие этапы его жизненного цикла за пределами обратной транскрипции. Точно так же растет количество клинической информации, что дает новое понимание клинических и иммунопатологических особенностей. Несмотря очевидность того, что важно исследовать все вирусные генные продукты и шаги репликации для возможностей вмешательства, наша команда экспертов сделала вывод о том, что элиминация сссDNA HBV является наиболее приоритетным подходом к получению либо полного лечения, либо длительного контроля инфекции после терапии. Степень, в которой это может быть надежно достигнуто с помощью лекарств, биологических препаратов, генетических манипуляций и / или иммуномодуляции, является основными вопросами, на которые следует ответить. Хотя транскрипционное молчание cccDNA может быть легче достигнуто, чем ее физическое устранение, вероятно, для достижения пожизненного эффекта потребуется и пожизненное лечение, если только терапия не спровоцирует долговременный эффект, такой как иммунная элиминация или нецитолитическая элиминация cccDNA из инфицированных клеток. Энергичная, всесторонняя исследовательская работа, включающая множественные, взаимодополняющие должны быть приняты.
Antiviral Res.
2017 Dec 13. pii: S0166-3542(17)30649-6. doi: 10.1016/j.antiviral.2017.12.009. [Epub ahead of print]
Слитый белок TAT на C-конце HDAg-L препятствует сборке и секреции вируса гепатита D.
Huang HC1, Lu HF2, Lai YH3, Lee CP4, Liu HK5, Huang C6.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29247673
Вирус гепатита D (HDV) содержит одноцепочечный круглый РНК-геном, который кодирует две формы антигена гепатита дельта (HDAg), малый дельта-антиген (HDAg-S) и большой дельта-антиген (HDAg-L). Два белка имеют идентичную аминокислотную последовательность, за исключением того, что HDAg-L имеет на 19 аминокислот больше, которые расположены на конце C.
Область, охватывающая аминокислотные остатки 198-210 HDAg-L (HDAg-L (198-210)), содержит сигнал ядерного экспорта (NES), который важен для доставки РНК HDV в ядро клетки и обратного процесса.
В этом исследовании мы установили клеточный проницаемый - слитый белок TAT-HDAg-L (198-210) с использованием рекомбинантной технологии E. coli, чтобы определить его функцию при инфекции HDV.
Цитотоксичность слитого белка TAT-HA-HDAg-L (198-210) исследовали с использованием MTT-анализа, в то время как анализ GST-pull-down показал, что слитый белок TAT-HA-HDAg-L (198-210) препятствует взаимодействию между HDAg-L и тяжелой цепью клатрина (CHC). Кроме того, клеточное распределение HDAg-L в присутствии HBsAg наблюдалось при окрашивании иммунофлюоресценцией и было обнаружено, что слитый белок TAT-HDAg-L (198-210) препятствует ядерному экспорту HDAg-L. Более того, сборка вирусоподобных частиц HDV (VLP) снижалась экспрессией слитого белка TAT-HDAg-L (198-210). Слитый белок TAT-HDAg-L (198-210) также ингибировал сборку вирусных частиц и секрецию HDV в модели мыши. Эти результаты показывают, что слитый белок TAT-HDAg-L (198-210) ингибирует ядерный экспорт HDAg-L и конкурирует с C-концом HDAg-L для взаимодействия с CHC.
2136
подробнее
, сразу хотел бы написать, что в целом, встречается это крайне редко, мне пришлось потрудиться, что бы найти такие исследования и тебе это не грозит, поэтому не нужно предпринимать каких то действий в связи с этим. 
ты настоящий друг